2023年7月1日實施的GB14922-2022將金（jīn）黃色葡萄球菌從SPF級齧齒動物和兔的“必（bì）檢項”調整為“必要時檢測項”，這（zhè）讓實驗動物設施管理者（zhě）和獸醫們在製定自己設施的監測項目清單時有了自由選擇的空間。那麽金（jīn）黃色葡萄球菌（jun1）在實驗動物中（zhōng）存在的可能性究竟有多少，對動物（wù）健康和研究有哪些影響，是（shì）否要將其從自己設施的監測清單中刪除呢？本文將對金黃色葡萄球菌的（de）基本信息進（jìn）行整理介紹（shào），為讀者朋友們提供（gòng）參考依據（jù）。

病原學介紹

金黃（huáng）色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）隸屬葡萄球菌屬（Staphylococcus）葡萄球菌科（Staphylococcaceae），該屬（shǔ）除了最廣為人知的金黃（huáng）色葡萄球菌外還包括木糖葡萄球菌（S.xylosus）、）、鬆鼠葡萄球菌（S. sciuri）、尼泊爾葡萄球菌（S. nepalensis）等二十餘（yú）種葡萄球菌。

葡萄（táo）球菌屬細菌是革蘭陽性球菌，大小約0.5~1.5μm，呈2~4個細菌或無規則葡萄狀排列、無（wú）動力（lì）、無芽孢、無鞭（biān）毛或形成有限（xiàn）的莢膜。

流行病學

人、齧（niè）齒類（lèi）動物、兔等多種動物都是金黃色葡萄球菌的天然宿主，主要通過直（zhí）接接觸或間（jiān）接接觸感染的動物、汙染物等傳播。在健康人群中，金黃色葡萄球菌的檢出率約為25%。在實驗動物中，由於飼（sì）養、管理、種子質量等不同，不同的動物群（qún）體中檢出率會存在較大差異（yì）。

美國CharlesRiver統計從2003-2020年該公司檢測實驗（yàn）室接收（shōu）的小鼠中金黃色葡萄（táo）球菌檢出率是2.2%(n=98979)，大鼠檢出率是23.6%(n=10413)。歐美幾個主要實驗動物供應商的監測報告則顯示其小鼠金黃色葡萄（táo）球菌檢出情況差別較大，甚至出（chū）現同一供應商不同設施或不同級別動物檢出率不同的情況（kuàng）。例如CharlesRiver北美和加拿大的無病毒抗體（VAF）小鼠中檢出率最（zuì）高（gāo），達20.9%， JAX實驗室標準小鼠中則（zé）隻有0.8%，其他（tā）供（gòng）應商不同微生物等級小鼠的檢出率從0到9.7%不等（děng）（表1）。歐洲的實驗動物設施則參考FELASA的要求，不報告SPF小（xiǎo）鼠的金黃色葡萄球菌檢測情況。這些數據表明，在世界範圍（wéi）內常（cháng）規SPF實驗小鼠和大鼠群體中金黃色葡萄球菌都是普（pǔ）遍存在的。不過由於（yú）免疫缺陷動物在感染金黃色葡萄球菌後更容易發展成有症狀的臨床疾病，因此國外主要供應商無一例外的都在自己的免疫缺陷動物種群（qún）中都排除了該菌。詳見表1。

表1 歐美主要（yào）供應商不同設施中小鼠金黃色葡萄球菌檢出率

注：a：屏障設施的具體定義由各個供應商提供，詳細可參考其網站。SPF：無特定病原（yuán）體，SOPF：無特定和機會性病原體，VAF：無病毒（dú）抗體。  b：數據收集於2016年11月。CharlesRiver，Janvier和Envigo累積數據18個月、JAX實（shí）驗室12個月， Taconic 6個月。  c：根（gēn）據FELASA的建議未報告金黃（huáng）色葡萄（táo）球菌。

西山（shān）生物（wù）2022年的檢測數據顯示：我國大鼠中金黃色葡萄球菌有12.56%（n=1 154）的檢出率；而小鼠中檢出率較低，僅有0.28%（n=8 228）。此外，潘金春等報告2013—2015年廣（guǎng）東省實（shí）驗小鼠的金黃色（sè）葡萄球菌檢出（chū）率為0.7%（n=858），實驗大鼠的金黃（huáng）色葡萄球菌（jun1）檢出率為2.9%（n=104）。這些數據表明我國小鼠（shǔ）中金（jīn）黃色葡萄球（qiú）菌感染率較低，但大鼠（shǔ）則要高許（xǔ）多。

對從實驗小鼠和（hé）大（dà）鼠中分離到的（de）金黃色葡（pú）萄球菌進一步分（fèn）型分析發現，C88型最常見（jiàn），占54.5%，也有許（xǔ）多（duō）人類中常見（jiàn）的株型，例如CC1, CC5, CC8, CC15, CC10，CC30等被（bèi）檢出，合計占比為37.4%。考慮到一個世紀以（yǐ）來（lái）實（shí）驗小鼠和大鼠與人類的密切接觸史，研究者們認為這（zhè）些菌株最初就是從人類傳播給（gěi）齧齒（chǐ）類動物的。但並不是所有適應（yīng）人類的金黃色葡萄球菌（jun1）都能在齧齒（chǐ）類群體中定植。例如CC30和CC45在人類中是最常見（jiàn）的黃（huáng）色（sè）葡萄球菌，但（dàn）在小鼠中很少能檢測到，在大鼠中則幾乎完全不存在。相應的，大小鼠中最常見的C88也未見有感染動物設（shè）施內工作人員的報道。這說明金黃色葡萄球菌從齧齒類動物傳播到（dào）人是不易（yì）發生的。

從實（shí）驗室小鼠、大鼠中分離到的金（jīn）黃色葡萄球菌較（jiào）少攜帶免疫逃避基因（yīn）IEC及編碼人類特（tè）異性（xìng）毒力因子的MGE基（jī）因（yīn），同時，由於實驗小鼠中通常不會使用抗生素（sù），細菌消除（chú）了保持抗藥性（xìng）基因的壓力（lì），因此小鼠（shǔ）金黃色葡（pú）萄球菌對青黴素的耐藥率低於人（rén）類菌株，且大多（duō）數小鼠和大鼠分離株（zhū）缺乏氨苄西林耐藥性，這些都顯示這些菌株長期適應了齧齒動（dòng）物宿主。

在齧齒類實驗動物和（hé）人群（qún）中分離的金黃色葡萄球菌的這些差異提示，盡管金黃色葡萄球菌有從人傳播到實驗齧（niè）齒類動物的風險，但是實驗動物中所流行（háng）的細菌（jun1）主要來自動物群體內部。

臨床症狀

健康且免疫功能健全的（de）齧齒動物和兔的（de）皮（pí）膚、黏膜或腸（cháng）道中即使可以檢（jiǎn）出金黃色（sè）葡萄球菌但一般也都是無症狀的，這種隱性感染占絕大多數，這（zhè）也是這次國標修訂過程中將該菌從（cóng）必檢項調整為必要時檢測項的主要原因之（zhī）一。

在出現臨床症狀的齧齒（chǐ）類動物中，最經常出現的症（zhèng）狀包括潰瘍性皮（pí）炎、創傷性皮炎、皮膚膿腫、包（bāo）皮腺膿腫、子宮內膜炎等。出現臨床症狀的兔可表現為皮下膿腫、乳腺炎、足皮炎和敗血（xuè）症等。

圖1 裸鼠葡萄球菌感染導致出現麵部膿腫、眼（yǎn）眶腫脹、皮屑

其他葡萄球菌

2023年1-6月，蘇州西山生物檢測部在（zài）對客（kè）戶送檢的出現皮屑、脫毛、皮膚腫脹（zhàng）、破潰、結膜炎等症狀的實驗小鼠樣本的鑒定檢測過（guò）程中發現，21份送檢樣本有20份是（shì）葡萄球菌感染引起。其中鬆鼠葡萄球（qiú）菌陽性12例，木（mù）糖葡萄球菌陽性11例，其次為緩（huǎn）慢葡萄球菌（4例）、科氏葡萄球菌（3例）、尼泊爾葡萄球菌（2例）、頭（tóu）葡萄球菌（1例）和金黃（huáng）色葡萄球菌（1例），見圖2。這說明，目前在臨床上（shàng），金黃色葡萄球菌不應是我們唯一關注的葡萄球菌，多種葡萄球菌都可能感（gǎn）染齧齒類實（shí）驗動物並可能發展為有症狀（zhuàng）的（de）感染性（xìng）疾病，其中（zhōng）小部分（fèn）會造成動物群體大規模發病。CharlesRiver 2003-2020年的檢測數據也顯示，小鼠（shǔ）相關樣本（běn）的PCR檢測中發現了木糖（táng）葡萄球菌有高達51.8%（n=1426）的檢出。木糖葡萄球菌、鬆鼠（shǔ）葡萄球菌等定（dìng）植並導致齧齒類實（shí）驗動物出現皮膚病變也多（duō）有報道。因（yīn）此實驗動物在出現疑似傳染性臨床疾病後應及時檢測鑒定（dìng），如果是由於葡萄球菌感染（rǎn）導致，應對這些菌（jun1）株做進一步（bù）分析（xī）確認其株（zhū）型，對那些已經確（què）認的（de）高毒力株型（xíng）或已經造成大量（liàng）動物發病的，應積極采取措施，將其徹底從自己的設（shè）施中清除（chú）。

圖2.葡萄球菌在（zài）小（xiǎo）鼠（shǔ）皮（pí）膚感染病例中（zhōng）檢出情況

檢測

目前采用較（jiào）多的檢測方法為細菌分（fèn）離（lí）培養法以及（jí）生化鑒定。同時，PCR方法進行核酸檢測也被越來越廣泛地應用於篩查檢測和分型檢測。此外，MALDI-TOF MS質譜法直（zhí）接（jiē）對微生物的蛋白質混合物進行分析，能（néng）夠快速鑒定菌種，也是目前臨床上常用的鑒（jiàn）定方法。

圖3.葡萄球菌在血瓊脂平板上的菌（jun1）落形態

預防和控製

在原來沒有（yǒu）金黃（huáng）色葡萄球菌的（de）屏（píng）障設施中，後期可能會通過（guò）一些偶然因素導致細菌的引入，從Charles River五個屏障設施的回顧性數據顯示，一個金黃色葡萄球菌陰性屏障設施要10個月到4年的時間才可能變為陽性，一旦引入，如果不加以監測排（pái）除，則細菌會很容易長期定（dìng）植並穩定傳（chuán）播給（gěi）後代，但是在不同籠子（zǐ）之間的傳播效率則是不一定（dìng）的。可以肯定的是獨立（lì）通風籠具的使用、良（liáng）好的衛生措施和（hé）規範的飼養管理操作可以有（yǒu）效阻斷傳（chuán）播，降低感染率。

因此對（duì）於那些決定（dìng）要將金黃色葡萄球菌保留（liú）在（zài）自己的監測清單的設施而言（yán），就需要對引入的動物和（hé）維持的動物進行（háng）監測（cè）並及時剔（tī）除感染動物，同時加強工（gōng）作人員個人防護措施，還需加強對（duì）環境的清潔和消毒。金黃色葡（pú）萄球菌對多數消毒劑都敏感，但是對幹燥環（huán）境有抗性。

對研究的影響

大多數情況下，金（jīn）黃色葡萄球（qiú）菌感染不會影響研究，這是本次國（guó）標修訂將該菌從必檢（jiǎn）項調整為必要時檢測項的另（lìng）一主要原因。不過（guò）金黃色葡萄（táo）球菌的（de）定植啟（qǐ）動了小鼠免疫係統，誘導了許多對金黃色葡萄球（qiú）菌蛋白特異性的IgG免疫應答，這（zhè）將影響葡萄球菌相關（guān）的感染實驗和疫苗研究，因此做這類研（yán）究時還是應使用不攜帶該（gāi）菌的動物。

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