血（xuè）生化檢測

血生化（huà）檢測是對實驗動物血液內離子、脂類、蛋白質和各種酶等物質濃（nóng）度的檢測（cè）。這些檢測項目的變化一般都與特定器官的功能有關，對評估實驗動物健康狀態以（yǐ）及（jí）驗證實驗動物造模（mó）是（shì）否成（chéng）功（gōng）等，都具（jù）有重要指導意義（yì）。由於血生化（huà）涉及項目較多，本號將分兩篇對其進行介紹。

絕大多數血生化檢測都可以用血清或肝素血漿（jiāng）樣本檢測，兩者的檢測結果會有差（chà）異，但（dàn）這種差異並無臨床意義。然而，對於需要長期監測動物，相同指標應在監測周期內選擇相同樣本進行檢測。樣本的保存（cún）和抗凝劑的使用均應根據不同的檢測項目進行選擇。此外，樣本采集的質量可直接影響檢測結果。

對於大多數血生化項目，樣本應在采集後及時檢測，如不能及時檢測，3天內可4℃或冷凍（-20℃或更（gèng）低溫度）保存；若（ruò）保存時長超出3天，需冷凍（-20℃或更低溫度）保（bǎo）存，切忌將樣本反複凍（dòng）融後進（jìn）行檢（jiǎn）測。但一些生化項目低溫保存也會影響其活性，如（rú）乳酸脫氫酶和穀草轉氨酶（méi）。

尿素、鉀、鈉離子避免使用含銨鹽類抗凝劑進行檢測；穀丙（bǐng）轉氨酶、肌酸激酶和總蛋白避免使用（yòng）枸櫞酸鈉抗凝劑進行檢測。本文僅列（liè）出部分生化項的抗凝劑選擇，更多信息可參（cān）考WHO 2002年發布的《實驗室檢查中抗凝劑的使用》。

齧齒動物尤其實驗大小鼠的（de）血生化參（cān）考範圍，目前仍沒有建（jiàn）立標準參考。這與（yǔ）實驗大小鼠的（de）品係眾多有關。已有文獻證明，不同品（pǐn）係的小鼠血生化會有差異。並且血生化的結果（guǒ）與動物的（de）年齡和性別等因素相關。另外，由於不同機（jī）構使用的檢測方法不同，如幹式生化分析儀和（hé）濕式生化分析儀，且使用試劑盒品牌不同、試劑盒檢測原理不同等，均會導致結果（guǒ）不同。這些因素（sù）都導致了實驗大小鼠的血生（shēng）化標（biāo）準參考範（fàn）圍無法建立，目前可查到的參考範圍，均應根據內部情況進行參考。

蛋白質與（yǔ）肝膽功能檢測

1.   總蛋白（Total protein, TP）

血（xuè）液等體液中的蛋（dàn）白質種類眾多，但目前尚無一種（zhǒng）常規檢測技術可以對體液中各種類型蛋（dàn）白質總量進行（háng）準確測（cè）定。因此，臨床對體液（yè）中總蛋白質測定通常是假設所有的（de）體液蛋白質均是單純（chún）蛋白質，且各種體液蛋白與化（huà）學試劑的反應性均一致。基於以上兩個假設，目前測定總蛋白最常用的（de）方法有雙縮脲法和紫外分光光度法。血清中的總蛋白實際檢測的是除（chú）纖維蛋白（bái）原以外的成分，因（yīn）此用血漿測定總蛋白較血清測定值偏高。

總蛋白的（de）濃度主要反應肝髒合成功（gōng）能和腎（shèn）髒病變造成蛋白質丟失情況，可以用（yòng）來判斷機體的水合狀態（tài），脫水的動物總蛋白濃度會相（xiàng）對升高，即（jí）高蛋（dàn）白血症。當（dāng）動物出現慢性（xìng）肝髒疾病、骨髓瘤、自身免疫（yì）性疾（jí）病、慢性炎（yán）症和感染等，會導致TP和（hé）球蛋白同時升高（gāo）。

過度（dù）水合動物總（zǒng）蛋白濃度會相（xiàng）對降低，即低蛋白血症，此時動物可能會出現（xiàn）浮腫、胸腔或腹腔積液。TP和白蛋白（bái）同時降低常見於（yú）肝功能（néng）受損導致蛋白質合成減少（shǎo）、營養不良、蛋白丟失過多（duō）、消耗增加等病理性因素（sù）。

2.   白蛋白（Albumin, ALB）

ALB由肝實質   細胞合成分泌，是血漿中含量最多的蛋白質，大部分動（dòng）物的白蛋白占血漿蛋白的35%~50%。ALB是動物機體（tǐ）內重要的營養蛋（dàn）白，參與維持內環境穩定，也是血漿中多（duō）種物質（zhì）的主要轉運蛋白。當出現炎性疾病、漿細胞瘤、淋（lín）巴瘤、腎小（xiǎo）球腎（shèn）炎、營養不良（liáng）、過度水（shuǐ）合等，均會導致齧齒動物出現血清白蛋白的降低；ALB升高則（zé）多見於脫水動物。

3.   球蛋白（Globulin，GLB）

球蛋白可以分為α球蛋白、β球蛋白和γ球（qiú）蛋白，大多（duō）數α球蛋白和β球蛋白由肝（gān）髒合成，γ球蛋（dàn）白由漿細（xì）胞合成。α球蛋白中比較重要的兩種蛋白質分別是高密度脂蛋白和極低密（mì）度（dù）脂蛋白；β球（qiú）蛋白包括補體（C3、C4）、轉鐵蛋白和鐵蛋白；γ球蛋白（即免（miǎn）疫球蛋白）包括IgG、IgD、IgE、IgA和IgM。

球蛋白（bái）的濃度一般通過（guò）總蛋白與白（bái）蛋白的差值來進行計算。球蛋白減少主（zhǔ）要由於合（hé）成減少，如（rú）使用免疫抑製劑；球蛋白的增加多（duō）見於γ球蛋白，常見原因（yīn）有慢性肝髒疾（jí）病、免疫性疾病（bìng）、骨（gǔ）髓瘤等。

4.   白蛋白/球蛋白（A/G）

白球比應結合蛋白質指（zhǐ）標（biāo）進行分析，不同種類、品係、年齡、性別動物的（de）白球比都有差異（yì），很多（duō）病理狀態會改變白球比。當白蛋白和球蛋白（bái）均變化時，如出血導致白蛋白和球（qiú）蛋白丟失、脫水（shuǐ）導致（zhì）球蛋白和白（bái）蛋白增加時，A/G比值（zhí）將變化不大或保（bǎo）持在正常範圍內；當其中（zhōng）一個數值發生變化且（qiě）占主（zhǔ）導時，那麽A/G比值將發生（shēng）異常，如免疫球蛋白的（de）產生導致A/G比（bǐ）值降低、免疫球蛋白缺乏導（dǎo）致A/G比值增（zēng）高。在臨床上，ALB、TP、GLB和A/G比（bǐ）值應結合一起進（jìn）行分析。

5.   穀丙轉氨酶（Alanine aminotransferase, ALT）

臨（lín）床（chuáng）上（shàng）廣泛用來作（zuò）為肝細胞損傷指標，也是（shì）中間代謝的關鍵（jiàn）酶。ALT主要存（cún）在於肝（gān）髒，但也廣泛存在於腎髒（zāng）、心肌、骨骼肌、胰腺等組織中，這些組織出現損（sǔn）傷或壞死，也會導致血清ALT水平升高。由於ALT主要（yào）存（cún）在（zài）於細（xì）胞質，釋放比較容易，因此ALT升高可出現在組織損傷早期。血液中ALT的水平與肝損（sǔn）傷（shāng）的嚴重程度不呈現相關性，ALT通常（cháng）會在肝損傷12h內（nèi）升（shēng）高，並在24~48h內達到（dào）峰值，除非存在慢性肝損傷，一般情況（kuàng）下血清ALT水平會在幾（jǐ）周（zhōu）內恢複正常。比較特殊的是（shì），豚鼠中ALT活性（xìng）較低，因此ALT不適合用來作為判斷其肝損傷的標誌物。

目（mù）前已發現在人類、大小鼠和狗中，ALT具有兩種亞型（xíng），分別為ALT1和ALT2，其中ALT1主要在腎髒、肝髒、脂肪和心組織中表達；而ALT2主要在肌（jī）肉（ròu）和脂肪中表達。在小鼠中，ALT2被認為是脂肪（fáng）變性的（de）標誌（zhì）物。ALT亞型的區分（fèn）可以更精準反應器（qì）官損傷情（qíng）況，但目前ALT分型的檢測尚未廣泛應（yīng）用在實（shí）驗動（dòng）物檢測（cè）中。

6.   穀（gǔ）草轉氨酶（Aspartate aminotransferase, AST）

AST主要存在於肝細胞內，在正常大鼠血清（qīng）中，細胞質中的AST約占總AST活性82%，線粒體膜上的AST約占（zhàn）總AST活性18%。此外，AST也（yě）存在於其他組織中，如（rú）心髒、骨骼肌、腎髒、胰（yí）腺等，這些組織損傷（shāng）或壞死時，血清中AST也（yě）會升高。AST水平升高表示非特異性肝髒損傷，齧齒動物在（zài）應激狀態或肌內注射也可能導致（zhì）AST升高，AST升高（gāo）應先檢查（chá）血清或血漿樣本是（shì）否溶血（xuè），結合肌酸激酶水平，排除是否為肌肉損傷導致AST升高，上述原因排除後，方可考慮（lǜ）為肝損傷導致AST升高。

7.   堿性磷酸酶（Alkaline phosphatase, ALP）

ALP是一組在酸性條件下（xià）水解磷酸單酯類化合物的酶，在許多組織中存在其同工酶，尤其是肝膽係統、骨骼內的成骨細胞、軟骨內的成軟骨細胞、腸（cháng）道細胞。ALP水平與齧齒（chǐ）類動物的年（nián）齡及性別具有（yǒu）相（xiàng）關性，處於生長期的未成年動物ALP水平較（jiào）高，隨著動物年齡的增長，ALP水平明顯降低；且大多數（shù）雌性動物ALP水平低於（yú）雄性動物。而ALP的病理性升高則常見（jiàn）於發生肝膽疾病、骨骼疾病、惡性腫瘤時（shí）的動物。

8.   γ-穀氨酰轉移酶（Gamma-glutamyltransferase, GGT）

GGT存在於許多（duō）組織中，包括腎髒、胰腺、腸道和肌細胞。GGT升高多見於動物發生肝髒疾病、膽管阻塞以及急性胰腺炎等。需要注意的是（shì），GGT在腎髒中濃度最高，但發生腎髒（zāng）疾病時，GGT的增加並不明顯，這（zhè）是因為GGT會（huì）從受損的管狀（zhuàng）上皮細胞中釋放到尿液中，而（ér）不是血液中。

9.   膽紅素（Bilirubin, Bil）

膽（dǎn）紅素是一種不可溶性分子，由脾髒內巨噬細胞降解（jiě）血（xuè）紅蛋白產生，是各種含血紅素蛋白中的血色素在（zài）一些係列酶（méi）作用下的降解產（chǎn）物，與脂類的消化吸收及黃疸形（xíng）成具有重要關係。膽紅素在光照下分解，因此，樣本應避光保存以保證結果準確性。當動物出現（xiàn）膽汁運輸障（zhàng）礙或腸道吸收不良時，會（huì）導致膽紅素降低；當動物出現溶血性疾病導致紅細胞破（pò）壞或（huò）內出血時（shí），可使膽（dǎn）紅素含量（liàng）增高。

10.  膽汁酸（Bile acids, TBA）

齧齒（chǐ）動物的膽汁酸代謝與（yǔ）人類有所不同，大小鼠（shǔ）的膽汁酸以膽固醇（chún）為原料在（zài）肝細胞中合成，由肝源性分（fèn）子組成，並主要與牛磺（huáng）酸結合。膽汁酸可以促（cù）進（jìn）脂類的消化吸收、調節膽（dǎn）固醇的代謝以及促（cù）進膽汁（zhī）分泌。當動（dòng）物出現肝功能受損、膽道阻塞等疾（jí）病時，均會導致膽（dǎn）汁酸水平增（zēng）加。

腎髒功能檢測

1. 尿素（Urea）

尿素是哺乳動物蛋白質代謝（xiè）的主要終末產物，可自由濾過腎小球，當腎（shèn）實質受損時，腎小球濾過率下降，血尿素濃度會升高，因此可以通過（guò）測定尿素水平來評估腎功能。需要（yào）注意的是（shì），產（chǎn）尿（niào）酶菌（如金（jīn）黃色葡萄球菌/變形杆菌（jun1）屬/克雷伯菌屬）汙（wū）染的血液樣本（běn）可導致尿素分解，導致尿素水平下降，為避免這種情況，樣本采（cǎi）集後應及時進行檢（jiǎn）測，如不能及時檢（jiǎn）測，應將（jiāng）樣本放置在冰（bīng）箱冷藏中保存。另外不同（tóng）性（xìng）別及年齡（líng）差異，也會影響尿素水平，隨著動物年齡（líng）增長，尿（niào）素水平會呈現下降趨勢。尿素的（de）增加多見於高蛋白飲食、脫水以及腎（shèn）功能衰竭（jié）等。

2. 肌酐（Ceatinine, Crea）

血肌酐經腎小球（qiú）濾過進入（rù）原尿，並且不被（bèi）腎小管重新（xīn）吸收，機體內肌酐應保持恒（héng）定，因此（cǐ）測定血肌酐水平可以用來評估腎功能。但是（shì）和尿素一樣，肌（jī）酐不是腎功能（néng）的準確（què）指標，當腎功能損傷近75%時，方可引起血肌酐水平升高。肌酐降低（dī）則多見於動物營養不良、貧血等。

3. 尿酸（Uric acid, UA）

尿酸是嘌呤堿基代（dài）謝產物，主要（yào）存在於肝髒中，小部分可經肝髒（zāng）隨膽汁排泄。尿酸可自由濾過腎小球，也可腎小管排泄。因此，排除外源性尿酸幹擾，血尿酸可反映腎小球濾過功能和腎小（xiǎo）管（guǎn）重吸收功能。當機體出（chū）現急性或慢性腎炎、多發性骨髓瘤等均會導致UA升高；肝髒壞死、肝功能衰竭（jié）等病理原因則會導致UA降低。