血生化檢測

我們在前（qián）文《齧齒動物血生化項目分析（上）》中介（jiè）紹了齧齒動物的蛋白質與肝膽功能指標以及腎髒功能（néng）指標的檢測意義。本文我們將繼續（xù）對齧齒動物的脂質（zhì）代謝、胰腺功能、糖代謝等相關（guān）常見血生化指標（biāo）進行介紹。

脂代謝檢（jiǎn）測

脂質的運（yùn）輸對機體內細胞功能、代謝等起著至（zhì）關重要的作用，此外它（tā）還對組織（zhī）起著保護作用，也作為生物體（tǐ）最重要（yào）的能量來源之一。由於脂質（zhì）具有很（hěn）廣泛的作用，因此其穩態也會隨著機（jī）體疾病等發生變化。

1.總膽固醇（Total cholesterol, TC）

血清總（zǒng）膽固醇（chún）指血液中各脂蛋白所含膽固醇總（zǒng）和。齧（niè）齒類動物的脂代謝指（zhǐ）標與人類相比差（chà）異（yì）明顯。大小鼠體內的大部分膽固（gù）醇都（dōu）以高密度脂蛋白形式存在，且缺乏膽固醇酯轉運蛋白（CETP）。膽固醇濃度的增（zēng）加多見於動物內分泌、肝髒或腎髒疾病；降低則常見於動物營養不良等。

2.甘油三（sān）酯（Triglyceride, TG）

甘油三（sān）酯構成脂肪組織，參與TC合（hé）成（chéng）以（yǐ）及血栓形成。需要注意的是，小鼠的血脂比較（jiào）穩定，對抗高血脂的能力很強，甘油三酯不容易升高，尤其（qí）C57BL小鼠一般不適（shì）合單純用於高甘油三酯血（xuè）症的造模。TG升高多見於動物過度肥胖、糖尿病等，而營養不良則是導（dǎo）致其降低的主要因素。

3.高密度（dù）脂蛋白（High-density lipoprotein, HDL）

高密度脂蛋白（bái）主要由肝髒（zāng）和小腸（cháng）合成，含有膽固醇、蛋白質和磷脂，但甘油三酯很少。 與人類和非人靈長類動物不同的是，大鼠體內的HDL濃度高於LDL（低（dī）密度脂蛋白膽固醇），這可能是由於（yú）大鼠體內缺乏膽（dǎn）固醇酯轉運蛋白（bái）（CETP）所（suǒ）致。

高密度脂蛋（dàn）白可以（yǐ）清除體內膽固醇，當HDL升高時，並非病理表現（xiàn），無需關注；當動物出現動脈硬化、糖尿病、慢性腎衰時，HDL表現（xiàn）為降（jiàng）低，且老（lǎo）年動物更易出現降低情況。

4.低密度脂蛋白（Low-density lipoprotein, LDL）

低密度脂（zhī）蛋白由極低（dī）密度脂蛋白（bái）轉化而來，含有豐富的蛋白（bái）質、少量的（de）膽固醇和甘油三酯。因此，LDL出現降（jiàng）低的情況，提示動物機（jī）體血脂不高，可（kě）不予關注；但當LDL出現升高時，應該考慮甲狀腺功能低下、慢性腎衰等，尤其需要關注動脈粥樣硬（yìng）化（huà），LDL是發生動脈粥樣硬化的重要危險指標之一。

5.脂蛋白（Lipoprotein, Lip）

齧齒類動物會在肝髒和（hé）小（xiǎo）腸中合成載脂蛋（dàn）白（apoB-100和apoB-48），它們（men）是血漿中運輸脂類的重（chóng）要成分。血漿中載脂蛋白水平上升，與糖尿（niào）病（bìng）腎病、尿毒症等相關；肝髒疾病可使載脂蛋白（bái）水平下降。

6.遊離脂肪酸（Nonestesterified Fatty Acid, NEFA）

遊（yóu）離脂肪酸在肝髒、脂肪（fáng）和乳腺組織中（zhōng）合（hé）成。當動物長（zhǎng）期使用高脂肪/低碳水化合物的（de）飼料時，會導致NEFA合成減少；當動物患有伴有脂肪酶活性增高的高血脂（zhī）症時（shí），會（huì）導（dǎo）致血漿中（zhōng）NEFA增加。

胰腺功能（néng）檢（jiǎn）測

胰（yí）腺分為兩部分功能，一部分具有外分（fèn）泌功（gōng）能，這部分又稱為胰腺腺泡，是胰腺最大的組成（chéng）部分，用來評估胰腺胰泡功能的檢測包括（kuò）澱粉酶和脂肪酶。另一部分具有內分泌功能，許多檢測（cè）都可（kě）用來評估胰腺的內分泌功能，如傳統（tǒng）的血糖監測，以及果糖胺和糖化血紅蛋白等。

1.澱粉酶（Amylase）

澱粉酶分子量較小，可被（bèi）腎小球濾過，是尿液中唯一可見的（de）血清酶。澱粉酶雖主要來源於胰腺，但唾液腺和小腸也可以產生（shēng）。澱粉酶在大鼠和小鼠（shǔ）的唾液（yè）腺中的濃度高於其他實驗動物，因此大小鼠澱粉酶的增（zēng）高也可以考慮涎腺疾病。

通常，血澱粉酶濃度升高最常見於急性胰腺炎，此外，慢性胰腺炎的複發期和胰管阻塞也可致澱粉酶升高。但是澱粉酶升高（gāo）的水平與胰腺炎的（de）嚴重程度沒有（yǒu）直接的（de）比例關係。由於澱粉酶可以（yǐ）經腎髒排泄，因此任何原因導致腎小球濾過率降低時，都（dōu）可引起血清澱粉酶升高。

2.脂肪酶（Lipase）

脂肪酶是一組催化長鏈脂肪酸甘油酯水解的酶。大多數血（xuè）清脂（zhī）肪（fáng）酶來源於胰腺，少量來源於胃腸道黏（nián）膜。過量的脂肪酶經腎（shèn）髒濾（lǜ）過，因此在胰腺疾病早期，脂肪酶仍處於（yú）正常水平，當病情逐漸加重時，脂肪酶水平才出現升高趨勢。

在慢性進行性胰腺疾病中（zhōng），受損（sǔn）的胰腺細胞會被結締組織取代，導致不能產生相應的酶，因此澱粉酶和脂肪酶會呈現漸進性降低。脂肪酶活性升高多見於腎髒和肝髒功能異常。此外，服用類固（gù）醇藥物（wù）可引起脂（zhī）肪酶升高，但對澱粉（fěn）酶（méi）無影響。

糖代謝檢測（cè）

1.葡萄糖（Glucose, Glu）

血糖的水平可以用來評估胰（yí）腺功能，其調節機製（zhì）比較複（fù）雜，除了胰島素分泌缺乏（fá）外（wài），胰高血糖素、甲狀（zhuàng）腺素（sù）、腎上腺素和糖皮質激素都可以使血糖升高；葡萄糖降低多見於營養不良、慢性貧血等。由於成熟紅細胞（bāo）會利用葡萄糖提供能量，因此在使（shǐ）用血漿或者血清樣本時，應（yīng）立即將血清或血漿與紅細胞分離（lí），否則在（zài）室溫條件下，紅細胞會使樣本中血糖（táng）含量（liàng）每小（xiǎo）時下降10%。在檢測葡萄糖前（qián），應對動（dòng）物進行禁食，但（dàn）對於齧齒（chǐ）動物（尤其小鼠（shǔ））來說，由（yóu）於（yú）它們屬於夜間進食動物，如果進行夜間禁食（shí），其代謝消耗相當（dāng）於靈長類動物禁食24-48小時（肝髒糖原基本耗盡），因此（cǐ）5-6小時禁食更（gèng）適（shì）合小鼠。

2.糖化血紅蛋白（Glycated hemoglobin, GHb）

糖（táng）化血紅蛋白也稱為血紅蛋白A1C（HbA1c），是血紅蛋白與葡萄糖發生不可逆結合反應（yīng）的產物。當機體發生高血糖時，血紅蛋白與葡萄糖結合（hé）增加，從而使糖化血紅（hóng）蛋白升高（gāo），因（yīn）此糖化血紅蛋白可（kě）以直（zhí）接反映機體血（xuè）糖水平。糖化血紅蛋（dàn）白反映的是紅（hóng）細胞壽命期間的平均血糖濃度，大鼠紅細胞壽命約60天，小鼠紅細（xì）胞壽命約（yuē）為35-50天。因此和果糖（táng）胺相比，糖（táng）化血紅蛋白（bái）反映了更長時間（jiān）內的血糖水平（píng）。但（dàn）需要注意的是如果檢測是基於高效液相層（céng）析法原（yuán）理，由於溶血性（xìng）貧血動物的紅細胞壽（shòu）命短，因此會導致糖化（huà）血紅蛋白結果出現假性（xìng）降低。

3.果糖胺（Fructosamine）

果糖胺是葡萄（táo）糖與蛋白質（尤其白蛋白）發生不可逆結合的產物。果糖胺升高表示動物（wù）持續存在高血糖；但動物發生低（dī）蛋白血症，其血清果糖胺水平會假性（xìng）降低。

有研究表明，果糖胺可在臨床研究中，可作為糖尿病動物的血糖監測的有效指標。

其他

在臨床檢測中，還有一（yī）些生化項不針對任何器（qì）官（guān）或係統，但可以輔助提供一些診（zhěn）斷信（xìn）息，如乳酸脫氫酶、肌酸激酶等。

1.肌酸激酶（méi）（creatine kinase, CK）

許多組織中都含有（yǒu）肌（jī）酸激酶，胃腸道、腎髒、脾髒和胰腺中含有少量CK，而骨骼肌（jī）、心肌和大腦中含有大量CK。因此當骨骼肌、心肌受損時，CK會從細胞中滲出，導致血液中CK含量增加。

由於任何損傷（shāng）肌（jī）細胞膜的物質都可（kě）以導致血液（yè）中（zhōng）CK升高，在實際檢測時，可對CK同工酶檢測來進行區分（fèn）損傷（shāng）來源。CK有3中主要同工酶：CK-MB（心髒型）、CK-BB（腦型）、CK-MM（骨骼（gé）型）。比較特殊的是（shì），在大鼠血小板中，CK含量是紅細胞的30倍，且目前僅發現存（cún）在CK-BB。

另外，肌內注射、手術（shù）等導致肌肉損傷可（kě）引起CK升高；   EDTA、陽光直射或測（cè）定不及時可引（yǐn）起樣本中CK假（jiǎ）性升高。

2.乳酸（suān）脫氫酶（lactate dehydrogenase, LDH）

乳酸脫氫酶是一種催化乳酸轉化為丙酮酸的血清酶。LDH一般不具（jù）有器官（guān）特異（yì）性，它來源廣泛，幾乎所有的組織中都含有LDH，但是物種間分布具有差異。如大鼠骨骼肌中分布最多，其次是心肌（77%）和肝髒（41%）。

LDH的升高雖然多見於肝髒受損和肌肉損傷，但是它缺乏（fá）評價肝損傷的特（tè）異性和敏感性。因此在齧齒動物（wù）中，LDH一般多用於檢測實驗性誘（yòu）導心肌（jī）損（sǔn）傷。為（wéi）了提（tí）高LDH測定心肌損（sǔn）傷的特異性，也可以測定其同工酶，即LDH1和LDH2。

需要注（zhù）意的是，在常用的實驗動物中，血小板、紅細胞、白（bái）細胞、肝髒中都可能會表達LDH同工酶，因此肝損傷、溶血和凝血均會混淆心髒損傷的診斷。另外（wài），感（gǎn）染乳酸（suān）脫氫酶增高（gāo）病毒（LDEV）的小鼠，血清中LDH含量可增（zēng）高（gāo）3-5倍（bèi）。

3.C-反（fǎn）應蛋（dàn）白（C-reactive protein, CRP）

CRP是第一個在人類身上發（fā）現的急性（xìng）期反應蛋白（Acute Phase Reaction Proteins，APR），目前CRP也被認為是齧齒動物的APR蛋白，肝細胞是合成CRP的主要部位。CRP的（de）主要（yào）生物學功能是通過於配體（凋亡（wáng）或壞死的細胞，或入侵的細菌、真菌、寄生（shēng）蟲等的磷酰膽堿）結合（hé），激活補體和單核吞噬細胞係統，將帶有配體的病原體或病理性細胞清除。在齧齒動物體內，當炎症或創（chuàng）傷發（fā）生後6h內，CRP可迅速（sù）升高至上千倍，在疾病治愈後，其含量急速下降。發生心髒病（bìng）、敗（bài）血症和（hé）腫瘤等多種（zhǒng）疾病，CRP都會急劇上升。

比較特殊的是，健康大（dà）鼠體內CRP值較高（gāo），且CRP的水平與年齡相關並呈正比。在健（jiàn）康小鼠和（hé）豚鼠（shǔ）血清中，幾乎無法（fǎ）檢出CRP。在這兩種動物（wù）體內，CRP不作為急性期蛋白而發揮作用。特別是豚鼠，在正常狀態和急性（xìng）期豚鼠血清中，都無法檢出CRP，這主要是因為（wéi）豚（tún）鼠CRP基因中缺乏適當的啟動子區域。