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 來源(yuán): 日期:2024.05.28 

齧齒類動物血常規結果分析注意事項

血液學檢查是動(dòng)物疾病狀態評估、術前檢查和常規體檢中必不可少的內容。評估血常規檢測(cè)報告的可(kě)靠(kào)性並解讀其結果是獸醫朋友們的工作日常。本文就血液學檢(jiǎn)查的一些要點進行分析探討。

采血是進行血常規檢查的第一步,本公眾號(hào)曾經發表《獸醫隨筆(bǐ):實驗動物采(cǎi)血指南》一文,介紹采血量和采血點的一般指導意見。

進行血液學分析時通常建議用EDTA抗凝(níng)管采集樣本,但采集時應該注意抗凝劑和血液的比(bǐ)例。樣本質量會顯著影響檢測結果,常見的樣本質量問題(tí)有:

抗凝效果不(bú)佳(jiā)導致出現血凝塊,會使血小板(PLT),白細胞(WBC),紅細胞(RBC),紅細胞壓積(HCT)假性降低;

溶血會使RBC、HCT假性降低的同時平均紅(hóng)細胞血紅蛋白濃度(MCHC)、平均紅(hóng)細胞血紅蛋白(bái)(MCH)假性升高;

乳糜血會使血紅(hóng)蛋白(Hb)、MCHC、MCH假性升高(gāo);

樣本不新(xīn)鮮會使紅細胞形態發生改變(biàn)導致MCV和HCT假性升高,MCHC假性降低,同時白細胞形態也會發(fā)生改變。

紅細胞、白細胞(bāo)和血小板是血常規報告中需要解讀的三個方麵。

紅(hóng)細胞

相比於人及其他哺乳類動物,齧齒類動物的紅(hóng)細胞自有(yǒu)其特征。倉鼠的RBC約(yuē)6.0微米,豚鼠的約7.8微米。大鼠出生時紅細胞較(jiào)大(10.03 μm),但在(zài)出生後30天內變到小於6μm。小鼠RBC大小約4-7μm,隨(suí)年齡增長而增加(jiā)。多(duō)色性是齧齒類動物血象的(de)一個常見特征。在豚鼠血塗片上還可(kě)見紅細(xì)胞(bāo)疊連。特定疾(jí)病模型小鼠中,如β地(dì)中海(hǎi)貧血模型小鼠RBC可觀察到(dào)異(yì)常形態,例如靶形紅細胞、棘形狀紅細胞、淚滴狀紅細胞、破碎狀紅細(xì)胞、有核紅細胞等。

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(圖片來源:https://www.researchgate.net/publication/233535082)

和大多數哺乳(rǔ)動物(包括人)不同的(de)是,新(xīn)生齧齒類(lèi)動物(小(xiǎo)鼠、大(dà)鼠、豚鼠、沙鼠)的血紅(hóng)蛋白和血細胞比容值低於成年動物;新出(chū)生大鼠有16%的網(wǎng)織(zhī)紅細胞,成年後則減少至2.5%;據報道,大鼠(shǔ)、沙鼠的RBC計數存在性別(bié)差異(yì),雌性的計數通常比雄性高。不同品(pǐn)係(xì)的小鼠和大鼠,血紅蛋白值也會有很大的差異。

樣(yàng)本采集部位或麻醉的影響會導致血常規數據的變化。例如,從大鼠尾(wěi)部采集的樣(yàng)本中的血紅(hóng)蛋白和紅細胞比容比從腹主動脈或心髒中采集的樣本中要高。豚鼠中已經證實RBC值可能由於麻(má)醉期間發生脾內紅細胞扣留而降低。

影響RBC參數的(de)非致病性條件還包括妊娠、季節變化等。在大(dà)鼠中,紅細胞比容在妊娠期間減少。在倉鼠中,RBC計數、血紅蛋白濃度和紅細胞比容在冬眠期間升高,這是因為在冬眠期間,倉鼠基礎代謝率降低,RBC壽命延長了。

紅細胞和貧(pín)血(xuè)

紅細(xì)胞指標重點關注RBC、HCT和Hb,它們的變化可以提示動物貧血或(huò)紅細胞(bāo)增多(duō)。

齧齒類動物中並沒有原發(fā)性(xìng)的(de)紅細胞(bāo)增多症,但可能見於輕度脫水的(de)動物。貧血則較為常見。初步判斷為(wéi)貧血後,還需要關注平(píng)均紅細胞體積(MCV),MCH和(hé)MCHC,可用於輔助判斷貧血類型,這三(sān)項都偏低常(cháng)見(jiàn)於缺鐵(tiě)性貧血,而高於(yú)正常範圍多見於葉酸或維生素B12缺乏(fá)引起的貧血。網織紅細胞是尚未完全成(chéng)熟的紅(hóng)細胞,是反映骨髓造(zào)血功(gōng)能的重要指(zhǐ)標。當其升高時,提示骨髓造血功能旺盛,可能有溶血(xuè)性貧血、缺鐵性貧血等;而(ér)當(dāng)其(qí)降低時,可能有再生障礙性貧血、急性白血病等。

儀器分析的血常規化驗單隻能給出各種細胞的數量,但(dàn)並不能給出細胞形態的異常描述。因(yīn)此為了更(gèng)準(zhǔn)確分析血液學檢查結果還建議對血樣塗片(piàn)進行形態學檢查。

RBC形態學可區分貧血的原因:出血、溶血、缺鐵(tiě)、非再生性貧血、骨髓疾病或淋巴(bā)細胞增生性(xìng)疾病(白血病)等。

如果診斷(duàn)為溶(róng)血性貧血,則(zé)需要(yào)在血塗片中尋找血液寄生蟲的證據,如球狀附(fù)紅細胞體和鼠血(xuè)巴爾通體可能導致小鼠或大鼠(shǔ)貧血。如果出現小紅細胞增(zēng)多症、血色素減少、總蛋白低、血小板增多和網織紅細胞計數升高(gāo)則提示有慢性失血,建議檢查體表寄生蟲,在虱子嚴重感染的豚鼠和(hé)大鼠中可見這種現象。

白細胞

白細胞(bāo)是機體抵禦感(gǎn)染(rǎn)、調控炎症、免疫和造血的(de)關鍵。

齧齒類動物的白細胞形態和(hé)其他哺乳動物(wù)相似,但又(yòu)有(yǒu)一定區別,齧齒類動物的粒細胞(bāo)被稱為(wéi)嗜異性或假嗜酸性粒細胞,因為它含有紅色顆粒,與嗜(shì)酸性粒細胞相似。豚鼠有獨特的Foa-Kurloff細胞(一種T淋巴細胞),含有一個大的(de)細(xì)胞質包涵(hán)體。齧齒類動物的白細(xì)胞類型與其他哺乳動物相似,但淋巴細胞數量遠超過粒細胞:淋巴細胞約占86%,中性粒(lì)細胞約(yuē)占10% ~ 25%,單核細胞約占6%,嗜(shì)酸性粒細胞約占1% ~ 4%,嗜堿性粒細胞很少。

WBC計數每天都會發生波動,因此采(cǎi)集樣本的位置和(hé)時間不同,結果也可能(néng)不同。中性粒細胞計數隨著大鼠年齡的增長而增加,淋巴細胞計數隨著年(nián)齡的增長而減少(shǎo)。

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豚鼠的Kurloff 細胞

(圖(tú)片來源:https://en.wikipedia.org/wiki/Kurloff_cell)

白細胞:淋巴細胞

淋巴細(xì)胞增(zēng)多

淋(lín)巴細胞分為T淋巴細胞和B淋巴細胞,大多在外周淋巴組織中生成(chéng)並在血液和淋巴組織中循(xún)環。淋巴(bā)細胞的增多大多(duō)為生理性的。反應性淋巴細胞增多的原因(yīn)包括注射疫苗後的短暫反應(yīng)、長期免疫刺激、甲(jiǎ)狀腺功能(néng)亢進等;腎上腺皮質功能(néng)減退也會導致(zhì)淋巴細胞增多,並常伴隨低血(xuè)糖(táng)、電解質異常,出現(xiàn)高鉀低鈉和高鈣血症;淋巴瘤、胸(xiōng)腺瘤可見淋巴細胞異常升高(gāo),淋巴細胞性白血病則在淋巴細胞異(yì)常升高的同時伴有其他細胞係的減少(shǎo)。

淋巴細胞(bāo)減少

淋巴(bā)細胞減少最常見(jiàn)的(de)原(yuán)因是(shì)內外源性皮質類固醇激素增多,導致(zhì)其(qí)從血液循環中轉移到淋(lín)巴組織中。在急性炎症反應、病毒感染以及發生內毒素血症和敗血症時,也可見淋巴細胞減少。免疫缺陷病毒感染、免疫抑製藥物的使用也會讓淋(lín)巴細胞生成減少。淋巴回流受阻或丟失也會讓其計數減(jiǎn)少(shǎo)。

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(A)淋巴細胞,特征是有深紫色圓形核(hé);(B)單核細(xì)胞,特征是有腎形細胞核;(C)中性粒細胞,特征為有紫色(sè)多小(xiǎo)葉細胞核。

(圖片來源:Bjorner & Zhu, 2019)

白細胞:中性粒細胞

中性粒細胞(bāo)增多

與其他(tā)哺乳動物一樣,急性炎症反應的特征是中(zhōng)性粒細胞增多並有核(hé)左移(yí)。但並不是出現中性粒細(xì)胞增(zēng)多就意味著急性炎症反應,動物(wù)經曆劇烈運動、驚(jīng)嚇傷心等強烈情緒後也可出現生理性(xìng)中性(xìng)粒細(xì)胞增多,但不會出現核(hé)左移。

應激或皮質類固醇也可導致動物出現中性粒細胞數量增加,無左移。

此外慢性粒細胞性白(bái)血病、中性粒細胞功能障礙也可使中性粒細胞數量增加,同時出現核左移、多組織髓外生成粒細胞、血小板減少等異常。

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正常情況下,外周血液中性粒(lì)細胞以分葉核為主,胞核常分為2~5葉(yè),杆狀核較少。中性杆狀(zhuàng)核粒細胞增多或(和)出現晚幼(yòu)粒細胞、中幼粒細胞,甚至原始/早幼粒細胞的現象,稱為核左移。

中性粒細(xì)胞減少

中性粒(lì)細胞減少也非常常見,其中(zhōng)臨床常見的因素為嚴重的細菌感染,例如肺炎、敗血症(zhèng)、腹膜炎等,常會伴隨核左移和中毒性變化。骨髓疾病、藥物毒性、病毒感染和腫瘤等也可造成中性(xìng)粒細胞減少,同時可能(néng)會伴有紅細胞和(hé)血小板的減少。

白細胞(bāo):嗜酸性粒細胞

嗜酸性粒細胞主要(yào)聚集在皮膚、消化道(dào)和呼吸道黏膜(mó)等(děng)疏鬆結締組織中(zhōng),它的增多常見於寄生蟲感染的動物和發生I型超敏反應的動物。也由於其分布特點,大多血液(yè)寄生蟲不會(huì)引起嗜酸性(xìng)粒細胞增多。此(cǐ)外,還有一些臨床原因可導致嗜酸性粒細胞增多,比如(rú)嗜酸性粒細胞性(xìng)腸炎、嗜酸性肌炎等炎症反應;某些能(néng)促進嗜酸性粒(lì)細胞生成和釋放的(de)腫瘤(淋巴瘤、鱗狀細胞癌等);腎上腺皮質機能減退(tuì)等。

白細(xì)胞(bāo):嗜堿性粒細(xì)胞

嗜堿性粒細胞參與遲發性過敏(mǐn)和寄生蟲(chóng)免疫反應,因此嗜堿性粒細胞增多症常和嗜酸性(xìng)粒細胞增多症同時發生。此外還可見於高脂血(xuè)症、嗜堿性粒(lì)細胞性白血病和骨髓增生性疾病。

白細胞:單核(hé)細(xì)胞

單核細胞(bāo)等主要功能是吞噬作(zuò)用、調節(jiē)炎症反應、參(cān)與抗原提呈、參與鐵的調節。因此當機體出(chū)現(xiàn)急性或慢性炎症、組織壞死(sǐ)時,都會導致單核細胞增多。中性粒細胞減少時也會(huì)出現單核(hé)細胞代償(cháng)性增(zēng)加(jiā)。其他不常見的原因還包括應激或類固(gù)醇、單核細胞(bāo)白(bái)血病等。齧齒類動物中,多達25%的(de)F344大鼠會發生單核細(xì)胞(bāo)性白血病。發病動物外周血中,可見非典型性單核細胞,白細胞計數極度增高和溶血性貧血。

血小板

血小板為骨髓巨核細胞胞漿裂解脫落的小塊胞(bāo)質,其主要作用是(shì)凝血和止血,修補破(pò)損血管。齧齒類動物的血小板數量和凝血過程與其他哺乳動物相似。在(zài)小(xiǎo)鼠、大鼠或(huò)豚鼠中,未觀察(chá)到血小板計數的性別(bié)或(huò)品係差異。大(dà)鼠的血小板會(huì)聚集(jí),計數往往不可靠。

血小板減少

血小板減少症發生(shēng)時,動物可出現瘀斑、瘀點、黏膜出血、止血困難等。但血液分析儀判(pàn)讀(dú)為血(xuè)小板減少時,應做血塗片確認是否(fǒu)發(fā)生凝集,因為血小板做血液采集、運輸、儲存(cún)過程中會活(huó)化並(bìng)凝(níng)集進而影響機器讀取數據。通過無創性靜脈穿(chuān)刺采(cǎi)血、使用檸檬酸鹽抗凝劑、減(jiǎn)少采樣後(hòu)儲存時間、避免低溫等措施可(kě)以減少這種影響。

通常血小板減少(shǎo)是一過(guò)性的,跟多種係統(tǒng)性(xìng)疾病都有關聯,隨著疾病的康(kāng)複,血小板計數也會恢複正常。持續性的或進行性的血小(xiǎo)板減少(shǎo)症表明血小板(bǎn)生成或消耗持續失衡。例如血小板減少伴隨白細胞減少和(或)貧血通(tōng)常提示骨髓疾病引起的造血功能障礙;免疫介導的破壞等。

血小板增多

血小(xiǎo)板計數增多可能由原發性(xìng)血小板增多症、骨髓(suǐ)增殖性疾病(bìng)和繼發(fā)性血小板增多症引起。

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