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 來源(yuán):實驗動(dòng)物那些事兒 日期:2024.05.14 

小鼠麻醉指導原則

目的(de)

本文是由ARC獸醫人員設計的小鼠麻醉(zuì)指導原則,旨在提供一(yī)般建議。這並不意味著它包含了適用於小鼠的所有可能藥物組合的詳盡列表。具體的麻醉(zuì)方案應根據特定情況和研究需求(qiú)與所在機構的獸醫合作製定。

麻醉是使動物完全或部分失去感覺,伴隨或不(bú)伴隨意識喪失。動物可能需要麻醉(zuì)進行(háng)手術、可能引起疼痛的非手術操作,或需要固定的非疼痛操作。在(zài)麻醉前(qián)、麻醉(zuì)過程中和麻醉後,必須(xū)采取措施確保動物的(de)安全和麻(má)醉的有效性。

麻醉可(kě)通過胃腸外給藥或吸入給藥的方式(shì)進行。藥物(wù)的選擇取決於具體操作、研究目的和其他因素,如動物的年齡。對於新生小鼠,有些特別考慮(lǜ)下文進行了概述。如對藥物選擇有疑問,請谘詢(xún)所在機構的獸醫。

01、麻醉的一般指導原則和注意事項

適應期:建議所有動物(wù)在運輸後適應一(yī)周,以防止應激引起(qǐ)的反應。動物至少需要(yào)72小時才能恢複到基本生理狀態。

禁食:由於小鼠無法嘔吐,通常麻醉前無需禁食。然而,如需禁食(例如為了保持體重),因小鼠(shǔ)的(de)高代謝率,禁食時間不應超過2-3小時。請(qǐng)注意,切勿限(xiàn)製飲水。

眼睛保護(hù):在麻醉狀態下,小鼠的眼睛會持續睜開,可能導致角膜幹燥和損傷(shāng)。因此,在如下條件下,應塗抹眼膏(如Puralube® 或 Lacrilube®)來保護眼睛(jīng)。

麻(má)醉持續時間超(chāo)過 5 min;

通過麵罩進行麻醉。

監護:無論使(shǐ)用何種麻醉劑,均應監測麻醉狀態下的(de)小鼠,以確(què)保心髒和呼吸功能不被過度抑製,以及麻醉深度適當。

在沒有專用設備的情況下,可(kě)以監測以下麻醉小鼠的參數(shù):

麻醉深度:通(tōng)過掐指檢查;

呼(hū)吸頻率和模式:正常未受幹擾(rǎo)的(de)呼吸(xī)率(lǜ)約為 180 bpm,麻醉期間(jiān)可接受 50% 的緩慢下(xià)降速(sù)率;

粘膜顏色:應為粉紅色(sè)而非藍色或灰色;

體溫:可使(shǐ)用直腸溫度計監測體溫,體溫應保持在 36℃ 以上;

血氧(yǎng)飽和度和心率:可用專用的齧齒類(lèi)動物脈搏式血氧儀監測血(xuè)氧飽和度 (> 95%) 和心率(300-800 bpm);

如對監護或監(jiān)護設備有任何問(wèn)題,請與所在機構的獸醫聯係。

保溫:所有種屬(shǔ)在麻醉狀態下均存在低體溫的風險。小鼠由於體表麵積與體重比高(gāo),尤其容易受到(dào)影響。低體溫對動物會產生顯著的生理應激(jī),可能延長恢複時間並有(yǒu)潛在致命風險。

在所有麻醉過程中提供額(é)外的保溫措施。

補充熱源包括循環水毯、電(diàn)熱墊和可在微波或水浴中加熱的市售產品(如等溫墊或(huò)凝(níng)膠加熱器)。

切勿直接將動物(wù)放在熱源上(shàng)。

如對使用或(huò)購買額外的保溫來源有疑問,請與(yǔ)您(nín)所在(zài)機構(gòu)的獸醫聯係。

補液:在麻醉時間較長或(huò)動(dòng)物(wù)患病(bìng)、老年或虛弱的情況(kuàng)下,考慮腹腔或皮下(xià)注射溫熱的液體(tǐ)。更多信息請(qǐng)谘詢您的獸醫。

恢複:持續監測動物直(zhí)至其完全恢複。

在幹(gàn)淨的籠子裏,將動(dòng)物放在紙巾上(不使用墊(diàn)料)。這樣可以(yǐ)最大程度地減少氣管阻(zǔ)塞或肺炎的風(fēng)險。

麻醉後(hòu)的動物單獨放(fàng)在一個籠(lóng)子(zǐ)裏進行(háng)恢複(fù)。

恢複期間繼續提供額外的保溫。

當動物能夠走動時,將其送回原籠中子(zǐ),並提供飼料和水。

根據所進行的手術,為了(le)避免同籠夥伴啃縫線或切口處的創(chuàng)傷,小鼠可能(néng)需(xū)要在術後階段單獨飼養。任(rèn)何單獨飼養的(de)計劃都應包括在IACUC方案中,以便進行審查(chá)和批準。

02、麻(má)醉藥物和程序

吸入麻醉劑: 異氟烷是首選的吸入麻醉劑。 起效快、恢複可靠。

A. 吸入麻醉可以通過滴瓶法(fǎ)、誘導(dǎo)室、麵罩或氣管插管使用精密蒸汽器進行。

i.滴瓶法:

a.請勿使小鼠直接接觸液體吸入麻醉劑(可通過在棉花或紗(shā)布上放置不可滲透的網格來實現)。

b. 由於無法控製室內的麻醉劑(jì)濃度,並且濃度可能迅速達到有毒水(shuǐ)平,因此該(gāi)方法僅適用於(yú)非常短的手術,如尾部活檢、皮下腫瘤(liú)植入或麵(miàn)罩麻醉前的誘導。

ii.誘導室(shì)、麵罩和氣管插管:

a.這些需要配備氧氣源和精密蒸(zhēng)發器的氣體麻醉機。一些研究單位可能使用室內空氣而不是純氧作為氣源(yuán),這也是可接(jiē)受的(de)。

b.蒸發器必須與特定的吸入麻醉劑兼容。

c.由於小鼠(shǔ)呼吸能(néng)力較小(xiǎo),使用非循環呼吸係統。

iii. 當使用吸入性麻醉時(shí),使用(yòng)通風櫃或配備氣體清除(chú)係統的(de)麻醉係統(tǒng),以盡量減少職業(yè)暴露於排(pái)出氣體。

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B. 注射麻醉劑:氯胺酮(tóng)/賽拉嗪聯合使用是小鼠的首選注(zhù)射麻醉劑。

下麵列出了其他常用的注(zhù)射劑。

i. 小鼠對各種麻醉(zuì)藥的敏(mǐn)感性差異顯著。 年齡、體質、品係、健康狀況、基因調控和性別等因素都可能影響麻醉敏感性。以下劑量僅為一般指導原(yuán)則,基於上述因素可能存在顯著差異。在您(nín)的方(fāng)案中添加麻醉(zuì)劑時,建議提供一個範圍(wéi),以允許根據每隻動物(wù)的特定需求進行給藥。

ii. 不建議在小鼠中進行肌肉注射(IM),因(yīn)為可(kě)能導致組織刺激、跛行和自殘(cán)等並發症。

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*一(yī)個很好的初始方案是 100 mg/kg 氯胺酮和 7 mg/kg 塞拉嗪。

**阿替美唑(5 mg/mL)是右美托咪定(dìng)(0.5 mg/mL)濃度的 10 倍。

您需要 4-6 倍於右美(měi)托咪定體(tǐ)積的阿替美唑(5 mg/mL)來逆轉右美托咪定。然而,阿替美唑的安全範圍非(fēi)常高,因(yīn)此如果逆轉非常緊急,給予右美托咪定等體積的阿替美唑,可使阿替美唑(zuò)的劑量增加 10 倍,這是安全的。

同樣,使用與塞(sāi)拉嗪(20 mg/mL)等體積的阿替美唑 (5 mg/mL) 逆轉也有效。雖然(rán)塞拉嗪具有更高的濃度(20 mg/mL),但阿(ā)替美(měi)唑(5 mg/mL)更純淨,且與α2 受體結合更緊密,因此等體積逆轉塞(sāi)拉嗪也可行。

C. 注射(shè)麻醉劑的一種類型是局部麻醉劑。

i. 局麻藥通過特異性結(jié)合神(shén)經細胞膜上的(de)電壓門控 Na + 通道來(lái)阻斷神經衝動。

ii. 給藥途徑包括(kuò)粘膜(鼻、眼等)局部給(gěi)藥或直接注射到組織和神經束周圍。

iii. 在(zài)疼痛刺激(如切口)之前給予局部(bù)麻醉劑被(bèi)認為是輔助鎮痛藥物(wù),與阿片類和 非甾體抗(kàng)炎藥(NSAID)一起使(shǐ)用。

iv. 由於持(chí)續時間較短(duǎn)(數小(xiǎo)時),不鼓勵將局部麻醉劑作為主要鎮痛藥物(wù)使(shǐ)用,

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03、對小鼠麻醉的特殊考慮:仔鼠麻醉

目前文獻中描述了幾種(zhǒng)適用於新生齧齒動物的麻醉方法,包括注射麻醉、吸入麻(má)醉和低溫麻(má)醉。 

新生齧齒動物的麻醉(zuì)會導致親代啃食後代的問題。可通過確保新生仔鼠完全恢(huī)複後再歸還給母(mǔ)鼠來(lái)減少這種情況。其他(tā)措(cuò)施包括讓幼仔接(jiē)觸(chù)來自(zì)於(yú)母鼠籠中的(de)汙(wū)染墊(diàn)料(liào),並將幼仔放在窩仔中間位(wèi)置。

低溫麻醉

低溫麻醉隻適用於7日齡以下的(de)新生齧齒動物,並且不應用於持續時間超過30分鍾的手術。

動物不應直接置於冰上(shàng)(在動物和底層冰浴之間使用乳膠手套或其他物質)。

當足部(bù)反射(shè)消失時,動物已達到適當的麻醉水平。

手術過程中請勿(wù)使用白熾燈,因為它會使手術區域變熱,導致動物(wù)從手術麻醉狀態中蘇(sū)醒。

麻醉後,動物應緩慢(màn)複溫。快速升溫可能會(huì)導致組織損傷。可使用循(xún)環(huán)水毯、加熱墊 (40℃) 或培(péi)養箱 (33℃) 中給(gěi)動物重新升溫。

幼仔能夠在(zài)無直接物理刺激的情況下移動後,可將其(qí)歸還給母鼠。

吸入麻(má)醉

新生(shēng)齧齒動物可能比成(chéng)年齧齒動物需要更長的吸入麻醉誘(yòu)導(dǎo)時間(jiān)。

在麻醉盒中進行誘導通常需 5% 異氟烷,維持(麻醉誘導盒或鼻錐)需 1-2%(流速 = 0.3-0.6 L/min)。

注射(shè)麻醉

氯胺酮/塞拉嗪是 7 日齡以上小鼠的推薦注射麻(má)醉劑:通過 27g 針頭 IP 注射 50-150 mg/kg 氯胺酮和 5-10 mg/kg 塞拉嗪(qín)(最大(dà)體積 = 0.5 mL)。

對於7日齡以上的小(xiǎo)鼠,推薦使用氯胺酮/塞拉嗪作為注射(shè)麻醉劑:使用27g針頭腹腔注射50-150 mg/kg氯胺酮和5-10 mg/kg塞拉嗪(最(zuì)大體積=0.5 ml)。

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