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 來源:實驗(yàn)動物(wù)那些事兒 日期:2023.10.24 

齧齒類動物手術指(zhǐ)導原則

1、背景

本文詳述了齧齒類(lèi)動物手術過程中需要遵(zūn)守的操作原則,在IACUC方案中列出了(le)相關替代流程的操作可除外。實驗研(yán)究者有責(zé)任確保動物得到充足的(de)麻醉/術後護理,提供護理的人員(yuán)必須(xū)熟悉方案(àn)流程(chéng),同時具備進行如下所示評估的技能和能力,並且必須能夠(gòu)在發(fā)生術後並發症時提供充足的(de)獸醫支持。值得注意的是,以下的這些原則描述的均是最低(dī)標準。

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2、麻醉和鎮痛

齧齒類(lèi)動物麻(má)醉指南和要求需在齧齒類動物麻醉護(hù)理的SOP中概述。除(chú)非有充足的理由,所有手術的鎮痛給藥應(yīng)在術前或術中開始,並持續至術後至少24小時(shí)。需要局部麻醉(zuì)時(shí),應在組織切開前注射局部麻(má)醉劑,利多(duō)卡因在注射2-5min內起效,布比卡因在注射15min內起(qǐ)效。

3、手術區域準(zhǔn)備

齧齒類動物手術操作區域必須位於設施內不同時開展其他活動的區域。使用前該區域必(bì)須清潔並保持整潔,所有物品、設備表麵均應清潔和消毒(dú)。

4、器械和創巾準備

手術(shù)前必須采(cǎi)用可接受的(de)方法對手術器械進行滅菌,方法包括高壓(yā)滅菌、環氧乙烷滅菌和特定的冷滅菌技術,單獨使用酒(jiǔ)精不是(shì)可接受(shòu)的滅菌方法。

滅菌器的功能以及器械包的無菌性(xìng)確認必須按照高壓滅菌器監測和無菌包裝儲存標準執行。

手術過(guò)程中,可使(shǐ)用熱珠滅菌器對(duì)器械進行(háng)重複滅菌:使用無菌紗布(bù)擦拭器械上的所(suǒ)有有機材料後,將其放入微珠中30-45秒(miǎo),此操作(zuò)最多用於4隻動物的手術器械滅(miè)菌,後續就必須拆用新(xīn)的手術(shù)器械包。

所有的植入物(微型泵(bèng)、導管、縫合材料)必須無菌。

應使用無菌鋪巾覆蓋未(wèi)剃毛的區域,鋪巾可接受的(de)材料包括棉(mián)布、透明粘性鋪巾和大紗布方塊。另外還需建(jiàn)立手術器械的無菌區域,以(yǐ)防汙染。

5、手術人員準備

所有手術人員必須戴口罩和手術(shù)帽,口罩將口鼻完(wán)全罩住,手術帽需將所有的(de)頭發包裹。手部刷洗完畢後,穿無(wú)菌(jun1)手術服,戴無菌(jun1)手套(不能接觸(chù)手套的外表麵)。整個過程保持器械(xiè)和手套的(de)無菌。

6、動(dòng)物準(zhǔn)備

手術因麻醉時間、體腔暴露麵積(jī)等原因,易出現術中體溫變(biàn)化(huà),需(xū)額外提供溫水毯等保溫措施。

雙眼塗抹眼膏,防止角膜(mó)幹燥。

必須清除(chú)切口周(zhōu)圍區域的所有毛發,可(kě)以使用剃毛(máo)刀或脫毛膏(使(shǐ)用(yòng)不當可導致皮膚(fū)的化學燒傷),脫毛的區域(yù)需要(yào)足夠大,以防器械或縫線接觸到未備好的皮膚。

對切口部位進行手術部位準備:(注:僅用(yòng)酒(jiǔ)精不能滿足切口的消毒需求),從手術切口部位開始向外(wài)旋(xuán)轉,以環形方式,使用碘伏或(huò)氯(lǜ)己定紗布(bù)進行消毒,每次(cì)使用後,丟棄紗(shā)布,重複至少三次。注意避免使用酒精等抗(kàng)菌劑過度濕潤手術區域,可能會加劇體溫的丟失,造成低(dī)體溫。

7、切口閉合

必須至(zhì)少分兩層閉合體腔(體壁和皮膚)。

為防止動物撕咬(yǎo)傷(shāng)口裂開,除非方案另有說明,否則必(bì)須采用簡(jiǎn)單間斷縫合方式閉合傷(shāng)口。

也(yě)可以使用傷口夾、組織膠閉合皮膚(fū),注(zhù)意塗膠過多是導(dǎo)致動物自(zì)殘和傷口裂開的常(cháng)見原因。外部縫線必須是單股材料(liào),以防止毛(máo)細作(zuò)用(yòng)及可能的傷口感染。

8、術後護理(lǐ)

動物蘇醒後,將動物送回籠中飼養,除非方案另有(yǒu)說明。作為支持(chí)性(xìng)治療計劃的一部(bù)分,可提前24-48小時將食物置於籠盒中。

研究人(rén)員應第二天(tiān)一早檢查動物狀態,之後至少每天檢查(chá)一次,持續7-10天,直至拆除縫線(xiàn)或傷口(kǒu)夾,確保動物可正常進(jìn)食、飲水、活動和走動。

檢查手術切口部位是否(fǒu)有透明或膿性分泌物、發(fā)紅(hóng)、腫脹、動物撕咬或傷口裂(liè)開。

若出現感染、疝氣、器官功能障礙等並(bìng)發症,及時谘詢獸(shòu)醫。除非方案中有描述,否則未經獸醫人(rén)員確認,不允許進行(háng)修(xiū)複手術。事先(xiān)未獲(huò)得批準而進行的(de)修複代表二(èr)次手術和不合規事件。

任何異常(例如脫水(shuǐ)、嗜睡、食欲不振)均需要谘(zī)詢獸醫(yī)進行支持(chí)治療,並持續頻(pín)繁的監測和護理。如(rú)果動物(wù)得到(dào)了適當及時的治療,但症狀持續惡化,則需要考慮對其進行安樂(lè)。

9、記錄保存

必須(xū)保存每隻或每籠動物的手術記錄。建(jiàn)議使用手術記錄卡,信息包括日期、手術名稱、使用的麻(má)醉劑和鎮痛藥以及給藥時間、術後的(de)監測記錄(lù)。動物監測期間記(jì)錄卡必須固(gù)定在籠盒上,最終由實驗室按照相關法規作為永久記錄保存。

10、非存活手術

建議提供額外的熱量來穩定動物的麻醉狀態,但不做嚴格要求。

所有的手術器(qì)械和植入物必須潔淨,但不一定無菌。對(duì)於>4小時的長時間手術,建議使用(yòng)無菌器械,以避免與細菌汙染相關的炎症。

手(shǒu)術區域必須剔除毛發,但該部位不(bú)需要無菌清洗。

術者可以(yǐ)穿戴新的檢查手套,而非(fēi)無菌手套。

參考文獻:

Principles of Rodent Surgery.  IACUC of WAYNE STATE UNIVERSITY.  12/2019

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